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誠(chéng)信經(jīng)營(yíng)質(zhì)量保障價(jià)格合理服務(wù)完善在生命科學(xué)、分子生物學(xué)和藥物研發(fā)領(lǐng)域,獲取清晰、準(zhǔn)確、可重復(fù)的凝膠圖像是實(shí)驗(yàn)成功的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。Bio-Rad伯樂公司推出的 ChemiDoc MP成像系統(tǒng) ,作為一款成像平臺(tái),其性能背后,是一套精密而高效的工作原理。本文將深入淺出地解析ChemiDoc MP如何將樣品中的微弱信號(hào)轉(zhuǎn)化為高質(zhì)量的數(shù)字化圖像,助您洞悉每一個(gè)科研細(xì)節(jié)。
一、核心成像原理:多模態(tài)熒光與化學(xué)發(fā)光的融合
ChemiDoc MP Imaging System 的核心優(yōu)勢(shì)在于其 “多模態(tài)"成像能力 。它并非采用單一技術(shù),而是整合了多種成像模式,以適應(yīng)不同樣品和實(shí)驗(yàn)需求。其工作原理主要基于以下幾個(gè)關(guān)鍵技術(shù):
1. 樣品激發(fā)與信號(hào)產(chǎn)生
熒光成像 :系統(tǒng)內(nèi)置了特定波長(zhǎng)的激發(fā)光源(如LED燈)。當(dāng)激發(fā)光照射到預(yù)先用熒光染料(如SYBR Safe, Cy3, Cy5等)標(biāo)記的樣品(如DNA/RNA凝膠、蛋白質(zhì)印跡膜)時(shí),染料分子吸收光能進(jìn)入激發(fā)態(tài),隨后在回到基態(tài)時(shí),會(huì)釋放出特定波長(zhǎng)、能量較低的發(fā)射光。
化學(xué)發(fā)光成像 :對(duì)于蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn),當(dāng)一抗、二抗與目標(biāo)蛋白結(jié)合后,加入化學(xué)發(fā)光底物。底物在辣根過氧化物酶(HRP)的催化下發(fā)生化學(xué)反應(yīng),并直接產(chǎn)生光信號(hào)。這個(gè)過程無需外部光源激發(fā)。
比色法成像 :對(duì)于傳統(tǒng)的染色膠(如考馬斯亮藍(lán)染色),系統(tǒng)利用高靈敏度的白光板進(jìn)行透射或反射照明,捕捉染色區(qū)域的吸光度差異。
2. 高靈敏度信號(hào)捕獲產(chǎn)生的光信號(hào)(無論是熒光、化學(xué)發(fā)光還是可見光)會(huì)穿過精密的鏡頭組,到達(dá)系統(tǒng)的“眼睛"——高分辨率、高靈敏度的科學(xué)級(jí)CCD或CMOS相機(jī) 。ChemiDoc MP配備了深度制冷的相機(jī),能有效降低在長(zhǎng)時(shí)間曝光過程中由熱噪聲產(chǎn)生的背景信號(hào),從而極大地提高了信噪比。這使得它能夠檢測(cè)到極其微弱的化學(xué)發(fā)光信號(hào)和低豐度的熒光信號(hào)。
3. 精準(zhǔn)的濾光片系統(tǒng)為了確保信號(hào)的特異性和純凈度,ChemiDoc MP配備了自動(dòng)化的 “濾光片輪" 。在熒光成像時(shí),系統(tǒng)會(huì)自動(dòng)選擇與特定熒光染料發(fā)射波長(zhǎng)相匹配的濾光片,只允許目標(biāo)信號(hào)通過,同時(shí)阻擋激發(fā)光和其他雜散光。這一步驟對(duì)于實(shí)現(xiàn)多重?zé)晒鈾z測(cè)(同時(shí)檢測(cè)兩個(gè)或多個(gè)目標(biāo))至關(guān)重要,能有效避免信號(hào)間的交叉干擾。
4. 智能化圖像處理與分析捕獲的原始數(shù)據(jù)被傳輸至配套的專業(yè)軟件(如Image Lab Software)。軟件會(huì)進(jìn)行一系列自動(dòng)化處理:
背景扣除 :自動(dòng)或手動(dòng)消除背景不均勻性。
信號(hào)定性與定量 :通過分析條帶的強(qiáng)度、大小和位置,對(duì)目標(biāo)分子進(jìn)行精確定量和分子量分析。
圖像優(yōu)化 :調(diào)整對(duì)比度、亮度,使結(jié)果呈現(xiàn)更清晰、更專業(yè),便于發(fā)表。
二、工作流程簡(jiǎn)述
準(zhǔn)備與放置 :將完成電泳的凝膠或孵育好的印跡膜放置在成像腔內(nèi)的樣品臺(tái)上。
模式選擇 :在軟件中選擇對(duì)應(yīng)的成像模式(如化學(xué)發(fā)光、熒光、比色法)。
自動(dòng)對(duì)焦與曝光 :系統(tǒng)自動(dòng)完成對(duì)焦,并根據(jù)信號(hào)強(qiáng)度智能調(diào)整曝光時(shí)間,或由用戶手動(dòng)設(shè)置。
圖像采集 :相機(jī)在參數(shù)下采集圖像,濾光片輪同步工作以確保信號(hào)純凈。
結(jié)果輸出 :軟件實(shí)時(shí)顯示圖像,并提供強(qiáng)大的分析工具,一鍵生成定量報(bào)告。
三、為何選擇ChemiDoc MP?工作原理帶來的核心優(yōu)勢(shì)
高靈敏度與寬動(dòng)態(tài)范圍 :得益于深度制冷相機(jī)和優(yōu)化的光學(xué)路徑,它能從單次曝光中捕獲從極微弱到強(qiáng)烈的信號(hào),無需多次曝光疊加,數(shù)據(jù)更真實(shí)可靠。
多功能性 :一臺(tái)設(shè)備即可替代傳統(tǒng)的凝膠成像儀、化學(xué)發(fā)光成像儀和多功能成像系統(tǒng),節(jié)省實(shí)驗(yàn)室空間與成本。
出色的定量準(zhǔn)確性 :精準(zhǔn)的光路設(shè)計(jì)和專業(yè)的分析軟件,確保了實(shí)驗(yàn)結(jié)果的可重復(fù)性和數(shù)據(jù)的公信力,滿足高水平期刊的發(fā)表要求。
操作簡(jiǎn)便高效 :自動(dòng)化的工作流程極大減少了人為操作誤差,提升了實(shí)驗(yàn)效率,即使是新手也能快速獲得高質(zhì)量的出版級(jí)圖片。
伯樂 ChemiDoc MP Imaging System 通過集成的光學(xué)系統(tǒng)、高靈敏度檢測(cè)器與智能軟件,將復(fù)雜的生物分子信號(hào)轉(zhuǎn)化為直觀、可靠的數(shù)字化圖像。其精妙的工作原理不僅是技術(shù)實(shí)力的體現(xiàn),更是每一位科研工作者在探索未知道路上值得信賴的伙伴。